ในการทดสอบ ELISA แอนติบอดีปฐมภูมิและแอนติบอดีรองทำอะไรได้บ้าง

ตอบ:

ขึ้นอยู่กับประเภทของการทดสอบของ ELISA

คำอธิบาย:

วิธี ELISA = การทดสอบเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับภูมิคุ้มกัน

การทดสอบ ELISA มีหลายประเภท สิ่งที่คุณต้องการคือ:

• แอนติบอดี้ที่มีเอ็นไซม์ติดอยู่
• แอนติเจนที่แอนติบอดีผูก
• สารตั้งต้นของเอนไซม์ซึ่งทำให้เกิดปฏิกิริยาที่วัดได้

เอนไซม์ ที่แนบมากับแอนติบอดีมัก HRP (พืชชนิดหนึ่งเปอร์ออกไซด์) HRP สามารถตอบสนองกับวัสดุพิมพ์ต่าง ๆ ที่เปลี่ยนสีหรือเปล่งแสงซึ่งสามารถวัดได้ทั้งคู่

ภาพแสดงภาพรวมของ ประเภทที่แตกต่างกัน ของ ELISA การตรวจ ฉันจะอธิบายวิธีการทำงานด้านล่าง

Direct ELISA

แผ่นเคลือบด้วยแอนติเจน (Ag) และ แอนติบอดีปฐมภูมิ ด้วยเอนไซม์จะถูกเพิ่ม เมื่อเพิ่มสารตั้งต้นปฏิกิริยาจะเกิดขึ้นและเป็นสัดส่วนกับปริมาณปฏิกิริยาระหว่างแอนติบอดีและแอนติเจน

ทางอ้อม ELISA

อีกครั้งแผ่นเคลือบด้วยแอนติเจนและ แอนติบอดีปฐมภูมิ ผูกกับแอนติเจน แอนติบอดี secundary มีการเพิ่มที่ผูกกับแอนติบอดีแรก แอนติบอดีที่สองมีเอนไซม์ที่ทำปฏิกิริยากับสารตั้งต้น

แซนวิช ELISA

มีแอนติบอดีสองหรือสามตัวที่เกี่ยวข้อง การจับแอนติบอดีจะยึดติดกับแผ่นเปลือกโลกและจับกับแอนติเจน ตามด้วยขั้นตอนเดียวกับวิธีโดยตรง (แอนติบอดีเพียงตัวเดียว) หรือวิธีทางอ้อม (แอนติบอดีสองตัว)

การแข่งขันของ ELISA

บางครั้งเรียกว่าการยับยั้ง ELISA นั้นซับซ้อนกว่าเล็กน้อย แผ่นเคลือบด้วยแอนติเจนที่จะทำการวิจัย แอนติบอดีปฐมภูมิ ด้วยเอนไซม์จะถูกบ่มครั้งแรกกับตัวอย่างที่มีความเข้มข้นที่ไม่รู้จักของแอนติเจนเดียวกัน สิ่งนี้จะถูกเพิ่มเข้าไปในจานทำให้แอนติบอดีที่ยังคงอิสระที่จะทำปฏิกิริยากับแอนติเจนบนจาน หลังจากคอมเพล็กซ์แอนติบอดี - แอนติเจนของตัวอย่างถูกชะล้างออกสารตั้งต้นจะถูกเพิ่ม

เมื่อตัวอย่างที่ไม่รู้จักมีแอนติเจนจำนวนมากจะมีแอนติบอดี้อิสระน้อยกว่าที่จะจับกับจาน = สัญญาณต่ำ