ทำไมเอนไซม์ จำกัด ถูกเก็บไว้ในสารละลายกลีเซอรอล 50%?

ตอบ:

เพื่อให้พวกเขาเหมือนเดิม …

คำอธิบาย:

เอ็นไซม์ จำกัด ใช้ในปริมาณน้อยมาก แต่มักจะซื้อในแบทช์ที่มีขนาดใหญ่กว่าเล็กน้อย

หากไม่มีสิ่งอื่นใดคุณมักจะต้องการทำการทดสอบที่แตกต่างกับแบทช์เดียวกัน จึงต้องมีการจัดเก็บแบทช์ที่ซื้อเป็นระยะเวลานาน

เอนไซม์ส่วนใหญ่มีความสุขอย่างสมบูรณ์แบบในบัฟเฟอร์ของพวกเขาที่ 4 องศาเซลเซียสชั่วครู่หนึ่ง แต่ในที่สุดก็จะเสื่อมสภาพ โดยปกติแล้ว 24 ชั่วโมงจะเป็นขีด จำกัด ที่ยอมรับได้

สำหรับการจัดเก็บระยะยาวต้องมีการแบทช์เป็นน้ำแข็ง -20C เป็นมาตรฐานและจะเก็บไว้เป็นเวลาหลายเดือน เป็นเวลานานกว่า (เช่นหนึ่งปีขึ้นไป) -70C เป็นบรรทัดฐาน

มีความจำเป็นต้องหยุดการแช่แข็งอย่างรวดเร็วและในภาชนะบรรจุขนาดเล็ก (เช่น Eppendorfs) เพื่อหลีกเลี่ยงการละลาย / refreezing บ่อยเกินไป

เพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายของโปรตีนที่อุณหภูมิต่ำเช่นนี้สามารถเพิ่ม / คงตัวเช่น DTT (Di-Thio-Treitol), เซรั่มอัลบูมินและที่สำคัญที่สุดคือกลีเซอรอล (5-50%)

น่าแปลกที่ -20C มีความจำเป็นต้องใช้กลีเซอรอล 50% ในขณะที่ -70 Glycerol นั้นไม่จำเป็นจริงๆแม้ว่าการเติมจะช่วยให้โปรตีนมีความเสถียร …