ตอบ:
ดูด้านล่าง …
คำอธิบาย:
เอนไซม์ที่ จำกัด จะถูกตัดที่ลำดับเฉพาะดังนั้นจึงต้องใช้เอนไซม์ที่มีข้อ จำกัด เหมือนกันเพราะมันจะสร้างชิ้นส่วนที่มีปลายเหนียวเสริมที่เหมือนกันทำให้สามารถสร้างพันธะระหว่างกันได้
มีไซต์ จำกัด ที่เข้ากันได้บางอย่างที่สามารถใช้ร่วมกันได้ Xho1 และ Sal1 เป็นตัวอย่าง ปลายเหนียวของพวกเขาตรงกันและเพื่อให้พวกเขาสามารถผูกเข้าด้วยกัน แต่ ligation จะฆ่าทั้งไซต์ Xho1 และ Sal1 ดังนั้นคุณจึงไม่สามารถใช้สิ่งเหล่านี้เพื่อตัดอีกครั้ง (ที่ตำแหน่ง ligation)
นอกจากนี้คุณยังสามารถใช้ exonuclease หรือ PCR เพื่อทำให้ปลายเหนียวที่สุด (5
หรือ 3
ยื่นออกมา) ไปยังไซต์ทื่อ - ด้วยวิธีนี้คุณสามารถเข้าไปในไซต์ที่ตัดทื่อได้ - แต่โดยทั่วไปจะเป็นการฆ่าไซต์ทื่อด้วยเช่นกัน
คุณสามารถหาข้อ จำกัด ของลำดับหรือพิจารณาว่าไม่มีขีด จำกัด สำหรับลำดับ {n ^ 4 / (n ^ 5 + 1)} หรือไม่
ลำดับมีพฤติกรรมเช่นเดียวกับ n ^ 4 / n ^ 5 = 1 / n เมื่อ n มีขนาดใหญ่คุณควรจัดการการแสดงออกเพียงเล็กน้อยเพื่อให้คำสั่งดังกล่าวข้างต้นชัดเจน แบ่งคำทั้งหมดด้วย n ^ 5 n ^ 4 / (n ^ 5 + 1) = (n ^ 4 / n ^ 5) / ((n ^ 5 + 1) / n ^ 5) = (1 / n) / (1 + 1 / n ^ 5 ) ข้อ จำกัด เหล่านี้มีอยู่เมื่อ n-> oo ดังนั้นเราจึงมี: lim_ (n-> oo) n ^ 4 / (n ^ 5 + 1) = (n ^ 4 / n ^ 5) / ((n ^ 5 + 1 ) / n ^ 5) = (1 / n) / (1 + 1 / n ^ 5) = 0 / (1 + 0) = 0 ดังนั้นลำดับจึงมีค่าเป็น 0
อะไรเป็นตัวกำหนดว่าข้อ จำกัด ที่ endonuclease "ตัด" โมเลกุล DNA สองโมเลกุลที่ตำแหน่งเดียวกันคืออะไร?
ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่เฉพาะเจาะจงในไซต์นี้ซึ่งเข้ากับไซต์ที่ใช้งานของเอนโดนิวคลีเอสนี้
PBR322 เป็นพลาสมิดที่มีไซต์ จำกัด สองแห่งสำหรับ EcoRI ในขณะที่ T4 phage DNA มีไซต์ จำกัด สามแห่ง DNA สองตัวนี้ได้รับการรักษาด้วย EcoRI และได้รับอนุญาตให้ทำงานกับ agarose gel รูปแบบของเจลชนิดใดที่จะได้รับ?
คำถามไม่ถูกต้อง T4 มีไซต์ประมาณ 40 แห่งสำหรับ EcoR1 ไม่ใช่ 3 ... pBR322 มีเพียง 1 ไซต์สำหรับ EcoR1 ระหว่างยีนปัจจัยความต้านทาน AMP และยีน TET ... ยีนย่อย T4: (ขอบคุณ Springer Verlag!) ภาพที่นำมาจาก http://link.springer.com/article/10.1007/BF00272920 © Springer-Verlag 1981 แต่หากคำถามของคุณมีข้อสมมติฐานมากกว่านี้: ทั้ง pBR322 และ T4-genomes เป็นวงกลมดังนั้น: pBR322: 2cuts = 2 แฟรกเมนต์, T4: 3cuts = 3 แฟรกเมนต์ วิ่งบน agarose gel คุณจะเห็น 2 band ใน pBR-lane, 3 band ใน T4-lane, UNLESS 2 หรือมากกว่านั้นมีขนาดเท่ากันหรือใกล้เคียงกับขนาดเท่ากัน . ในกรณีนี้พวกเขาจะโยกย้ายมากหรือน้อยที่ความเร็วเดียวกันและจะแยกไม่ออก อัตราส่ว