นักวิทยาศาสตร์จะแยก DNA เพื่อศึกษาได้อย่างไร

ตอบ:

มีสองขั้นตอนในการทำเช่นนี้โปรดเพิกเฉยต่อภาษาอังกฤษที่ไม่ดีของฉันฉันหวังว่าคุณจะยังคงเข้าใจกระบวนการได้

คำอธิบาย:

นี่ไม่ใช่เรื่องยากอย่างที่คุณคิด

สมมติว่าเราต้องการแยก DNA ออกจากต่อมไทมัสลูกวัวคุณต้องทำตามคำแนะนำเหล่านี้ (พวกมันเหมือนกันสำหรับแอปเปิ้ลเท่าที่ฉันรู้ แต่มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย):

1. เอา 3 กรัม 3 กรัมแล้วหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ เท่าที่จะทำได้

2. ใส่ในเครื่องปั่นที่มีเกลือโซเดียมซิเตรต (SSC) 75 มล. ต่อชิ้นและตรวจสอบให้แน่ใจว่าใบมีดของเครื่องปั่นครอบคลุมใน SSC อย่างสมบูรณ์ดังนั้นให้เพิ่มต่อมไทมัสหากคุณต้องการ

   SSC ทำให้แน่ใจว่าเยื่อหุ้มเซลล์กำลังถูกละลาย

   ปั่นต่อไปเรื่อย ๆ จนกระทั่งทุกอย่างราบรื่น

3. ใส่ไว้ในหลอดสำหรับเครื่องหมุนเหวี่ยงและใช้หลอดอีกเครื่องหนึ่งเพื่อให้เครื่องหมุนเหวี่ยงไม่แตก

4. วางหลอดในเครื่องปั่นแยกเป็นเวลา 20 นาทีที่ 5,000 รอบต่อนาที

5. เมื่อคุณนำหลอดออกจากเครื่องหมุนเหวี่ยงคุณควรเห็นชิ้นส่วนประกอบสองชิ้น ด้านล่างมีสารที่เป็นของแข็งนี้เรียกว่าเม็ดและสิ่งนี้ถือนิวเคลียสของเซลล์กับ DNA นอกจากนี้คุณยังจะเห็นสารของเหลวซึ่งเรียกว่า supernatant ซึ่งประกอบด้วย SSC ที่มีเยื่อหุ้มเซลล์ที่ละลาย

6. เท supernatant ในการเคลื่อนที่ของของเหลวหนึ่งครั้งเรียกว่า decanting และสิ่งนี้ทำให้คุณมีเม็ด

7. ใส่ NaCl จำนวน 2.2 M NaCl ลงในหลอดด้วย pellet เพื่อให้เม็ดนั้นถูกปกคลุมด้วย NaCl NaCl ทำให้โปรตีนที่ล้อมรอบ DNA ตกตะกอน

8. ผัดด้วยหลอดทดลองที่ว่างเปล่าหรือคันกวน ในที่สุดคุณควรได้รับสององค์ประกอบ โปรตีนที่อยู่ด้านล่างและของเหลวหนืดที่ด้านบนของที่

9. นำของเหลวที่มีความหนืดออกมาด้วยปิเปตและตรวจสอบให้แน่ใจว่าคุณไม่ได้ใช้โปรตีนใด ๆ กับของเหลวที่มีความหนืด (โปรตีนชิ้นเล็กมากยากที่จะหลีกเลี่ยงได้ แต่พยายามหลีกเลี่ยงโปรตีนให้มากที่สุด)

10. ใส่ของเหลวที่มีความหนืดซึ่งคุณเติมลงในบีกเกอร์และเพิ่มเอทานอล 2 เท่า แต่เพิ่มเอทานอลเบา ๆ เพราะคุณไม่ต้องการผสมกับ DNA ที่ส่วนต่อประสานระหว่างเอทานอลกับของเหลวที่มีความหนืดคุณจะเห็นฟองดีเอ็นเอกำลังขึ้นมา

11. ค่อยๆกวนด้วยแท่งแก้วดีเอ็นเอมีประจุลบดังนั้นควรติดกับก้าน

12. ใส่ในหลอดทดลองแล้วละลายด้วย SSC

เครื่องพิเศษสามารถบอกคุณได้ว่า DNA ของคุณแยกได้มากแค่ไหนและบริสุทธิ์แค่ไหน