ตอบ:
โดยทั่วไปแล้วนี่คือการทดสอบแอนติบอดีจำเพาะ
คำอธิบาย:
ใน ELISA เป็นเรื่องยากมากที่จะบอกว่าแอนติบอดีของคุณจับกับโปรตีนที่คุณสนใจโปรตีนที่แตกต่างอย่างสิ้นเชิงหรือโปรตีนหลากหลายชนิด
Western blot จะถูกใช้เพื่อตรวจสอบความจำเพาะของแอนติบอดี (คุณควรทราบว่า Western blot อาจไม่ตรวจจับปฏิกิริยาข้ามทั้งหมดกับโปรตีนที่ไม่ถูกต้อง)
ใน Western blot คุณสามารถดูขนาดของโปรตีนที่แอนติบอดีจับ (คุณไม่สามารถอยู่ใน ELISA) ตัวอย่างเช่นถ้าแอนติบอดีของคุณควรจับกับโปรตีน 56 kDa และคุณเห็นแถบที่ ~ 56 kDa บนจุดนั้นคุณจะมั่นใจได้อย่างสมเหตุสมผลว่าแอนติบอดีนั้นจะจับกับโปรตีนที่ถูกต้อง
ในทางตรงกันข้ามถ้าคุณเห็นวงดนตรีที่ 32 kDa คุณสามารถสรุปได้ว่าแอนติบอดีนั้นจับกับโปรตีนผิด ในทำนองเดียวกันถ้ามีวงดนตรีหลายวงปรากฎอยู่บนรอยเวสเทิร์นนั่นก็จะแนะนำ (ในกรณีที่ไม่มีการย่อยสลายโปรตีน) ว่าแอนติบอดีมีผลต่อโปรตีนหลากหลายชนิด
ในตัวอย่างของวง 32 kDa ที่ปรากฏบนเจลและหลายวงก็แนะนำว่าแอนติบอดีขาดความจำเพาะสำหรับ ELISA และผลลัพธ์ใด ๆ ที่เห็นใน ELISA อาจไม่เฉพาะกับโปรตีนที่น่าสนใจ
ถ้าฉันใช้การทดสอบประเภทนี้ฉันอาจรวมถึงน้ำยาที่ "รบกวน" เพื่อทดสอบแอนติบอดี ตัวอย่างเช่นถ้าฉันยกแอนติบอดีของฉันไปที่เปปไทด์ฉันอาจรวมเปปไทด์ในสารละลายแอนติบอดีปฐมภูมิเพื่อทดสอบการจับที่ถูกต้อง นั่นคือในการปรากฏตัวของเปปไทด์ฉันไม่ควรเห็นแถบหรือไม่มีผลจาก ELISA เนื่องจากแอนติบอดีปฐมภูมิของฉันจะไม่สามารถเกาะติดได้เนื่องจากมีเปปไทด์มากเกินไป
เวลาไม่ต่อเนื่องหรือต่อเนื่อง? ทำไม? + ตัวอย่าง
ข้อมูลที่ไม่ต่อเนื่องโดยทั่วไปคือคำตอบทั้งจำนวน ชอบต้นไม้หรือโต๊ะหรือคนกี่คน ขนาดของรองเท้าก็ไม่ต่อเนื่องเช่นกัน แต่น้ำหนักส่วนสูงและเวลาเป็นตัวอย่างของข้อมูลต่อเนื่อง วิธีหนึ่งในการตัดสินใจว่าคุณใช้เวลาสองครั้งเช่น 9 วินาทีและ 10 วินาทีคุณมีเวลาระหว่างสองสิ่งนี้หรือไม่? ใช่บันทึกเวลาโลกของ Bolt ใช้เวลา 9.58 วินาทีถ้าคุณใช้ 9 โต๊ะและ 10 โต๊ะคุณสามารถมีโต๊ะทำงานกี่อันในระหว่างนี้หรือไม่? ไม่มีโต๊ะ 9 1/2 โต๊ะคือโต๊ะ 9 โต๊ะและโต๊ะหัก!
ทำไม GAPDH ถึงใช้ใน Western Blot + ตัวอย่าง
GAPDH มักใช้เป็นตัวควบคุมการโหลด ในการซับแบบตะวันตกเรามักใช้ GAPDH เป็นตัวควบคุมการโหลด สิ่งนี้หมายความว่าโดยละเอียดสำหรับ GAPDH เราสามารถตรวจสอบว่าเรามีปริมาณโปรตีนที่เทียบเท่าในช่องทางต่าง ๆ ของ blot ตัวอย่างของการใช้งาน - บอกว่าเรามีโรคที่เราคิดว่าทำให้โปรตีนในเซลล์สูงขึ้น เราจะสร้างตัวอย่างจากเซลล์ "สุขภาพดี" และอีกตัวอย่างจากเซลล์ "โรค" จากนั้นเราจะโหลดปริมาณโปรตีนที่เท่ากันของตัวอย่างทั้งสองลงบนเจลสำหรับหยดดวงอาทิตย์ หลังจากการตรวจสอบปริมาณโปรตีนที่เราสนใจเราพบว่าในเซลล์ที่เป็นโรคนั้นระดับโปรตีนนั้นสูงขึ้นจริง ๆ (นั่นคือแถบสีเข้มจะถูกสร้างขึ้นบน blot) เพื่อพิสูจน์ว่าการเพิ่มขึ้นของโปรตีนนี้เกิดจาก
เหตุใด anastrophe จึงมีประสิทธิภาพ + ตัวอย่าง
เนื่องจากการเน้นเป็นพิเศษจะให้ประโยค Anastrophe เป็นการกลับรายการโครงสร้างประโยคปกติของคำ ตัวอย่างเช่น "อาหารนี้วิเศษ" กลายเป็น "น่าอัศจรรย์อาหารนี้คือ" มีการใช้มาตั้งแต่สมัยกรีกโบราณถึงแม้ว่าการใช้งานที่ได้รับความนิยมในทุกวันนี้มาจากตัวละครภาพยนตร์โยดา Anastrophe นั้นมีประสิทธิภาพเพราะมันบังคับให้ผู้อ่านคิดอีกต่อไปเกี่ยวกับประโยค เนื่องจากโครงสร้างประโยคที่มีสัญญาณรบกวนผู้ชมจะต้องไขปริศนาความหมายอย่างแข็งขันซึ่งทำให้ผู้ชมใช้เวลากับประโยคนั้นนานขึ้นซึ่งทำให้ประโยคนั้นมีความลึกโดยปกติ ตัวอย่างเช่น "Talent, Mr. Micawber มี; capital, Mr. Micawber ไม่มี" http://www. buttco.com/what-is-anastrophe-r